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性别鉴定异源双链分析—变性高效液相色谱

发布时间:2014-11-16 13:33 类别:宝宝男女

一种快速简便的方法性别鉴定异源双链分析,采用变性高效液相色谱(DHPLC)。

抽象

性别鉴定,使用变性的高性能液体色谱(DHPLC)系统,一种新颖的方法进行说明。 在许多用于识别性别的方法,比较流行的和可信的系统一直的聚合酶链反应(PCR)方法,使用的釉原蛋白的基因,这是两个X和Y染色体上共享的核苷酸的引物组。

这种传统的方法,判断取决于在检测到来自X和Y染色体之间的PCR产物的大小差异。

在这项研究中,我们采用DHPLC检测通过检查的产品,这使我们能够缩短45bp和分离时间的8分钟的时间内每个样品的PCR产物的异源双链之间形成的差异。 这个新的系统可能具有广泛的应用在许多不同的领域,如法医学鉴定,产前诊断,近亲繁殖的动物,人类学。

变性高效液相色谱基本原理:将工作温度 (柱温 )升高使DNA片段开始变性,部分变性的DNA可被较低浓度的乙腈洗脱下来。由于异源双链 (错配的 ) DNA与同源双链DNA的解链特征不同,在相同的部分变性条件下,异源双链因有错配区的存在而更易变性,被色谱柱保留时间短于同源双链,故先被洗脱下来,从而在色谱图中表现为双峰或多峰的洗脱曲线。